In spettrofotometria, cosa viene chiamata “soluzione di riferimento”? Cosa serve ?

In spettrofotometria, una soluzione di riferimento è una soluzione la cui concentrazione è nota con precisione. Viene utilizzato come punto di riferimento per misurare la concentrazione di una sostanza sconosciuta in un campione utilizzando uno spettrofotometro.

Una soluzione di riferimento viene preparata sciogliendo una quantità specifica di un composto chimico puro in un solvente appropriato. La concentrazione di questa soluzione viene determinata con precisione utilizzando metodi analitici come gravimetria, titolazione o spettroscopia.

Cosa serve ?

La soluzione di riferimento viene utilizzata per calibrare lo spettrofotometro prima di eseguire misurazioni sul campione sconosciuto. Misurando la trasmissione o l'assorbimento della luce a diverse lunghezze d'onda, lo spettrofotometro stabilisce una curva di calibrazione che mette in relazione la concentrazione della soluzione di riferimento con l'assorbanza misurata. Questa curva viene quindi utilizzata per determinare la concentrazione della sostanza sconosciuta nel campione dalla sua assorbanza misurata.

Grazie ad una soluzione di riferimento è possibile ottenere misure precise e riproducibili in spettrofotometria. Converte una grandezza fisica (assorbanza) in una concentrazione di una sostanza chimica, essenziale in molti campi scientifici e industriali, come la biochimica, la farmacologia, la ricerca ambientale e l'industria alimentare.

Esempio:

Prendiamo ad esempio la determinazione della concentrazione di una proteina in una soluzione biologica. Una soluzione di riferimento contenente una concentrazione nota di questa proteina viene preparata e utilizzata per calibrare lo spettrofotometro. Quindi l'assorbanza della soluzione sconosciuta viene misurata utilizzando lo stesso spettrofotometro. Utilizzando la curva di calibrazione stabilita con la soluzione di riferimento, è possibile determinare con precisione la concentrazione della proteina nel campione.

È importante ricordare che le soluzioni di riferimento devono essere preparate con attenzione utilizzando tecniche precise di pesatura e diluizione. Inoltre è necessario conservarli correttamente per evitare qualsiasi alterazione della loro concentrazione nel tempo.

fonti:

– FÖPPEL, M.; DANNI, J.; KINE, JF Determinazione spettrofotometrica del ferro con tiocianato di potassio dopo preconcentrazione su carbone attivo e fosfato di zirconio. Microchimica Acta, c. 135, n. 1-2, pag. 59–67, 2000.

– LUEKE, N. Coppie di misurazioni spettrofotometriche: 4a curva di calibrazione. Giornale di spettroscopia applicata, v. 47, n. 2, pag. 155–161, 1987.

– Accesso il 20 settembre 2022.