Una solución de referencia se prepara disolviendo una cantidad específica de un compuesto químico puro en un disolvente apropiado. La concentración de esta solución se determina con precisión mediante métodos analíticos como la gravimetría, la titulación o la espectroscopia.
Para qué sirve ?
La solución de referencia se utiliza para calibrar el espectrofotómetro antes de realizar mediciones en la muestra desconocida. Al medir la transmisión o absorción de luz a diferentes longitudes de onda, el espectrofotómetro establece una curva de calibración que relaciona la concentración de la solución de referencia con la absorbancia medida. Luego, esta curva se utiliza para determinar la concentración de la sustancia desconocida en la muestra a partir de su absorbancia medida.
Gracias a una solución de referencia, es posible obtener medidas precisas y reproducibles en espectrofotometría. Convierte una cantidad física (absorbancia) en una concentración de una sustancia química, lo cual es esencial en muchos campos científicos e industriales, como la bioquímica, la farmacología, la investigación medioambiental y la industria alimentaria.
Ejemplo:
Tomemos, por ejemplo, la determinación de la concentración de una proteína en una solución biológica. Se prepara y utiliza una solución de referencia que contiene una concentración conocida de esta proteína para calibrar el espectrofotómetro. Luego se mide la absorbancia de la solución desconocida usando el mismo espectrofotómetro. Utilizando la curva de calibración establecida con la solución de referencia, se puede determinar con precisión la concentración de proteína en la muestra.
Es importante mencionar que las soluciones de referencia deben prepararse cuidadosamente utilizando técnicas precisas de pesaje y dilución. Además, es necesario almacenarlos correctamente para evitar cualquier alteración de su concentración con el tiempo.
Fuentes:
– FÖPPEL, M.; DAÑOS, J.; KINE, JF Determinación espectrofotométrica de hierro con tiocianato de potasio después de preconcentración en carbón activado y fosfato de circonio. Mikrochimica Acta, c. 135, n. 1-2, pág. 59–67, 2000.
– LUEKE, N. Pares de medidas espectrofotométricas: 4ª curva de calibración. Revista de espectroscopia aplicada, v. 47, n. 2, pág. 155–161, 1987.
– Consultado el 20 de septiembre de 2022.