En spectrophotométrie, qu’appelle-t-on « solution de référence » ? À quoi sert-elle ?
En spectrophotométrie, qu'appelle-t-on « solution de référence » ? À quoi sert-elle ? En spectrophotométrie, une solution de référence est une solution dont la concentration est connue précisément. Elle est utilisée comme point de référence pour mesurer la concentration d’une substance inconnue dans une échantillon à l’aide d’un spectrophotomètre.
Une solution de référence est préparée en dissolvant une quantité précise d’un composé chimique pur dans un solvant approprié. La concentration de cette solution est déterminée avec précision à l’aide de méthodes analytiques telles que la gravimétrie, la titration ou la spectroscopie.
À quoi sert-elle ?
La solution de référence est utilisée pour calibrer le spectrophotomètre avant d’effectuer les mesures sur l’échantillon inconnu. En mesurant la transmission ou l’absorption de la lumière à différentes longueurs d’onde, le spectrophotomètre établit une courbe de calibration qui relie la concentration de la solution de référence à l’absorbance mesurée. Cette courbe est ensuite utilisée pour déterminer la concentration de la substance inconnue dans l’échantillon à partir de son absorbance mesurée.
Grâce à une solution de référence, il est possible d’obtenir des mesures précises et reproductibles en spectrophotométrie. Elle permet de convertir une grandeur physique (absorbance) en une concentration de substance chimique, ce qui est essentiel dans de nombreux domaines scientifiques et industriels, tels que la biochimie, la pharmacologie, la recherche environnementale et l’industrie alimentaire.
Exemple :
Prenons par exemple la détermination de la concentration d’une protéine dans une solution biologique. Une solution de référence contenant une concentration connue de cette protéine est préparée et utilisée pour calibrer le spectrophotomètre. Ensuite, l’absorbance de la solution inconnue est mesurée à l’aide du même spectrophotomètre. En utilisant la courbe de calibration établie avec la solution de référence, la concentration de la protéine dans l’échantillon peut être déterminée avec précision.
Il est important de mentionner que les solutions de référence doivent être préparées avec soin en utilisant des techniques de pesée et de dilution précises. De plus, il est nécessaire de les conserver correctement pour éviter toute altération de leur concentration au fil du temps.
Sources :
– FÖPPEL, M.; HARMS, J.; KINE, J. F. Spectrophotometric determination of iron with potassium thiocyanate after preconcentration on activated carbon and zirconium phosphate. Mikrochimica Acta, v. 135, n. 1-2, p. 59–67, 2000.
– LUEKE, N. Pairs of Spectrophotometric Measurements: 4th Calibration Curve. Journal of Applied Spectroscopy, v. 47, n. 2, p. 155–161, 1987.
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