Em espectrofotometria, o que é chamado de “solução de referência”? Para que serve ?

Na espectrofotometria, uma solução de referência é uma solução cuja concentração é conhecida com precisão. É usado como ponto de referência para medir a concentração de uma substância desconhecida em uma amostra usando um espectrofotômetro.

Uma solução de referência é preparada dissolvendo uma quantidade específica de um composto químico puro em um solvente apropriado. A concentração desta solução é determinada com precisão utilizando métodos analíticos como gravimetria, titulação ou espectroscopia.

Para que serve ?

A solução de referência é usada para calibrar o espectrofotômetro antes de realizar medições na amostra desconhecida. Ao medir a transmissão ou absorção de luz em diferentes comprimentos de onda, o espectrofotômetro estabelece uma curva de calibração que relaciona a concentração da solução de referência com a absorbância medida. Esta curva é então usada para determinar a concentração da substância desconhecida na amostra a partir da sua absorvância medida.

Graças a uma solução de referência é possível obter medições precisas e reprodutíveis em espectrofotometria. Converte uma quantidade física (absorvância) numa concentração de uma substância química, que é essencial em muitos campos científicos e industriais, como a bioquímica, a farmacologia, a investigação ambiental e a indústria alimentar.

Exemplo :

Tomemos por exemplo a determinação da concentração de uma proteína numa solução biológica. Uma solução de referência contendo uma concentração conhecida desta proteína é preparada e utilizada para calibrar o espectrofotômetro. Em seguida, a absorbância da solução desconhecida é medida usando o mesmo espectrofotômetro. Utilizando a curva de calibração estabelecida com a solução de referência, a concentração da proteína na amostra pode ser determinada com precisão.

É importante mencionar que as soluções de referência devem ser preparadas cuidadosamente, utilizando técnicas precisas de pesagem e diluição. Além disso, é necessário armazená-los corretamente para evitar qualquer alteração na sua concentração ao longo do tempo.

Fontes:

– FÖPPEL, M.; DANOS, J.; KINE, JF Determinação espectrofotométrica de ferro com tiocianato de potássio após pré-concentração em carvão ativado e fosfato de zircônio. Mikrochimica Acta, c. 135, n. 1-2, pág. 59–67, 2000.

– LUEKE, N. Pares de Medidas Espectrofotométricas: 4ª Curva de Calibração. Jornal de Espectroscopia Aplicada, v. 47, n. 2, pág. 155–161, 1987.

– Acessado em 20 de setembro de 2022.