एक उपयुक्त विलायक में शुद्ध रासायनिक यौगिक की एक विशिष्ट मात्रा को घोलकर एक संदर्भ समाधान तैयार किया जाता है। इस घोल की सांद्रता ग्रैविमेट्री, अनुमापन या स्पेक्ट्रोस्कोपी जैसे विश्लेषणात्मक तरीकों का उपयोग करके सटीक रूप से निर्धारित की जाती है।
ये किसके लिये है ?
अज्ञात नमूने पर माप करने से पहले स्पेक्ट्रोफोटोमीटर को कैलिब्रेट करने के लिए संदर्भ समाधान का उपयोग किया जाता है। विभिन्न तरंग दैर्ध्य पर प्रकाश के संचरण या अवशोषण को मापकर, स्पेक्ट्रोफोटोमीटर एक अंशांकन वक्र स्थापित करता है जो संदर्भ समाधान की एकाग्रता को मापा अवशोषण से संबंधित करता है। इस वक्र का उपयोग नमूने में अज्ञात पदार्थ की सांद्रता को उसके मापे गए अवशोषण से निर्धारित करने के लिए किया जाता है।
एक संदर्भ समाधान के लिए धन्यवाद, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री में सटीक और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य माप प्राप्त करना संभव है। यह एक भौतिक मात्रा (अवशोषण) को एक रासायनिक पदार्थ की सांद्रता में परिवर्तित करता है, जो कई वैज्ञानिक और औद्योगिक क्षेत्रों, जैसे जैव रसायन, फार्माकोलॉजी, पर्यावरण अनुसंधान और खाद्य उद्योग में आवश्यक है।
उदाहरण:
उदाहरण के लिए किसी जैविक घोल में प्रोटीन की सांद्रता का निर्धारण करें। इस प्रोटीन की ज्ञात सांद्रता वाला एक संदर्भ समाधान तैयार किया जाता है और स्पेक्ट्रोफोटोमीटर को कैलिब्रेट करने के लिए उपयोग किया जाता है। फिर उसी स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करके अज्ञात समाधान का अवशोषण मापा जाता है। संदर्भ समाधान के साथ स्थापित अंशांकन वक्र का उपयोग करके, नमूने में प्रोटीन की सांद्रता सटीक रूप से निर्धारित की जा सकती है।
यह उल्लेख करना महत्वपूर्ण है कि सटीक वजन और कमजोर पड़ने की तकनीकों का उपयोग करके संदर्भ समाधान सावधानीपूर्वक तैयार किया जाना चाहिए। इसके अलावा, समय के साथ उनकी एकाग्रता में किसी भी बदलाव से बचने के लिए उन्हें सही ढंग से संग्रहीत करना आवश्यक है।
सूत्रों का कहना है:
- फ़ेप्पेल, एम.; हार्म्स, जे.; सक्रिय कार्बन और ज़िरकोनियम फॉस्फेट पर पूर्व-सांद्रण के बाद पोटेशियम थायोसाइनेट के साथ लोहे का KINE, JF स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक निर्धारण। मिक्रोचिमिका एक्टा, सी. 135, एन. 1-2, पृ. 59-67, 2000.
- ल्यूके, एन. स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक माप के जोड़े: चौथा अंशांकन वक्र। एप्लाइड स्पेक्ट्रोस्कोपी जर्नल, वी. 4, एन. 47, पृ. 2-155, 161.
- 20 सितंबर, 2022 को एक्सेस किया गया।